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在對(duì)骨堿性磷酸酶進(jìn)行檢測(cè)的方法及注意細(xì)節(jié)介紹

更新時(shí)間:2022-06-22      點(diǎn)擊次數(shù):1077
  骨堿性磷酸酶全稱叫骨源性堿性磷酸酶即為NBAP.骨堿磷酸酶(NBAP)是成骨細(xì)胞的表型標(biāo)志物之一,它可直接反映成骨細(xì)胞的活性或功能狀況,是近年來(lái)主要用于小兒佝僂病早期診斷和亞臨床鑒別的特異性參考指標(biāo),也是目前用于評(píng)價(jià)人體骨礦化障礙的佳指標(biāo)。
  堿性磷酸酶與骨鈣化作用密切相關(guān),此酶的活性在胚胎期和骨骼發(fā)育期以及鈣化過(guò)程中均有一致關(guān)系。骨堿磷酸酶主要見(jiàn)于骨化的軟組織中,不見(jiàn)于無(wú)鈣化的軟骨中。此酶系成骨細(xì)胞所產(chǎn)生,當(dāng)成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)楣羌?xì)胞時(shí),此酶活性逐漸降低。
  骨堿性磷酸酶進(jìn)行檢測(cè)的方法及注意細(xì)節(jié)如下:
  1、首先是血球和血漿的分離,這一過(guò)程是基于全血樣品經(jīng)過(guò)血漿分離器將血球截留在分離器的血球容納膜上,而血漿滲濾穿過(guò)轉(zhuǎn)運(yùn)膜到達(dá)反應(yīng)膜的特定區(qū)域,血漿分離完成后,將血漿分離器從反應(yīng)裝置上取下。
  2、是本產(chǎn)品與血漿中其它組分,包括其它來(lái)源的堿性磷酸酶(ALP)分離達(dá)到特異測(cè)定骨堿磷酸酶的目的。這一目的實(shí)現(xiàn)是根據(jù)小兒型骨堿磷酸酶(N骨堿磷酸酶)和成人骨堿磷酸酶(A骨堿磷酸酶)分子結(jié)構(gòu)中糖基類型的不同,分別選擇相應(yīng)的親和素,我們可稱之為N骨堿磷酸酶-結(jié)合蛋白和A骨堿磷酸酶-結(jié)合蛋白,預(yù)先固相在反應(yīng)膜的特定區(qū)域—反應(yīng)區(qū)上。當(dāng)血漿經(jīng)過(guò)此區(qū)域滲濾時(shí),骨堿磷酸酶即被結(jié)合,而其它組成濾過(guò)或被滴加的洗滌液清洗掉,從而完成特異性親和反應(yīng)。
  3、方可進(jìn)行骨堿性磷酸酶的活性測(cè)定顯色反應(yīng)。反應(yīng)膜固定在反應(yīng)滑板上,待親和反應(yīng)完成后,將反應(yīng)滑板推動(dòng),使反應(yīng)膜到達(dá)反應(yīng)孔正中,將顯色液滴加到反應(yīng)孔內(nèi)的反應(yīng)膜上,在37℃反應(yīng)一定時(shí)間,酶促反應(yīng)顯色的深淺與骨堿磷酸酶活性成正比,對(duì)照說(shuō)明書上的標(biāo)準(zhǔn)色板目測(cè)判讀骨堿磷酸酶活性。
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